Descrição
O cultivo celular 3D é caracterizado por um crescimento celular tridimensional no qual as células regulam sua morfologia e fisiologia, tornando-se um sistema integrado e mais representativo do que ocorre in vitro, permitindo a possibilidade de mimetizar o microambiente tecidual encontrado in vivo. (1) Buscamos neste estudo o estabelecimento de um protocolo para obtenção dos esferóides a partir da linhagem de hepatocarcinoma humano, HepG2, que posssui pré-disposição para a formação natural dos esferóides. Para obtenção dos esferóides empregamos a metodologia de suspensão forçada na qual utilizamos uma placa de 96 poços com formato em “U”, analisando a formação das estruturas nos dias 3, 5 e 7, em três diferentes concentrações de suspensões celulares. Em todas as condições avaliadas, os esferóides apresentaram diâmetro médio que variaram de 282-376 µm. A viabilidade das células presentes nos esferóides foi confirmada pelo ensaio da integridade de membrana por azul de tripano apresentando valores que variaram de 25 a 79%. Todos os esferóides apresentaram formato arredondado, com boa compactação e região necrótica visível a partir do quinto dia de idade. Outros experimentos estão em andamento para mais análises quanto à morfologia, viabilidade e medidas dimensionais dos esferóides, além de análises microscópicas de campo claro, confocal e de varredura que serão realizadas para melhor estabelecimento e padronização de um modelo de cultura 3D para estudo in vitro da eficácia de nanocarreadores de fármacos.
Referências
1 BIAŁKOWSKA, K. et al. Spheroids as a type of three-dimensional cell cultures: examples of methods of preparation and the most important application. International Journal of Molecular Sciences, v. 21, n. 17, p. 6225-1-6225-17, 2020. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms21176225.
| Certifico que os nomes citados como autor e coautor estão cientes de suas nomeações. | Sim |
|---|---|
| Palavras-chave | Esferóides. Cultivo celular 3D. Crescimento celular tridimensional. |
| Orientador e coorientador | Valtencir Zucolotto. Celisnolia Morais Leite. Renata R. Miranda. |
| Subárea 1 | Biotecnologia |
| Subárea 2 (opcional) | Planejamento de Fármacos |
| Agência de Fomento | CNPq |
| Número de Processo | 138072/2022-1 |
| Modalidade | INICIAÇÃO |
| Concessão de Direitos Autorais | Sim |
