13ª Semana Integrada do Instituto de Física de São Carlos

Avaliação de compostos em patógenos bacterianos multirresistentes como parte do Centro de Pesquisa e Inovação em Biodiversidade e Fármacos (CIBFar)

21 de ago. de 2023 09:00

1h 30m

Salão de Eventos USP

Prêmio YPM 9h00 - 10h30

Descrição

Durante a “era dourada” dos antibióticos (1940 a 1950), quase todos os grupos de antibióticos utilizados atualmente foram descobertos. (1) Entretanto, apesar de a descoberta dos antibióticos ter revolucionado o tratamento médico, o uso indiscriminado destes fármacos levou à seleção de microrganismos resistentes. Entre estes microrganismos resistentes, um grupo de agentes patogênicos responsáveis pela maioria das infecções relacionadas à assistência em saúde (IRAS) se destaca: os patógenos “ESKAPE”. A sigla corresponde às iniciais dos seguintes agentes: Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa e Enterobacter spp., os quais tornaram ainda mais urgente a busca e desenvolvimento de novos fármacos que combatam as IRAS. (2) Frente a isso, desde 2013, o Centro de Inovação em Biodiversidade e Fármacos (CIBFar) tem como objetivo identificar novos compostos com atividades biológicas para estes e outros agentes patogênicos e o Laboratório de Epidemiologia e Microbiologia Moleculares (LEMiMo) realiza os ensaios antibacterianos, buscando extratos, substâncias isoladas e sintéticas que tenham atividade contra uma lista específica de bactérias representantes dos ESKAPE. Inicialmente, realiza-se uma triagem para detecção de atividade antibacteriana e, posteriormente, são determinadas a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM) para verificar se a atividade é bactericida ou bacteriostática. Juntamente a estes testes, pretende-se verificar se os compostos conseguem erradicar biofilmes bacterianos in vitro. A triagem inicial é realizada com todos os compostos e consiste em verificar a atividade do composto contra as linhagens ATCC na concentração de 512 µg/mL. Caso haja inibição do crescimento nesta concentração em comparação com o controle, a CIM e a CBM serão determinadas. A faixa de concentração das substâncias testadas para a determinação da CIM é de 512 a 0,0625 µg/mL como recomenda a norma M7-A10 descrita pelo Clinical and Laboratory Standards Institute. (3) Após a incubação, o crescimento e leitura visual dos resultados, uma alíquota do meio onde apresentaram inibição do crescimento bacteriano será semeada em placas de Petri com meio sólido para se determinar a CBM. No período de agosto de 2022 a julho de 2023, 153 compostos foram recebidos no LEMiMo. Dentre estes compostos, 54 apresentaram atividade na triagem, representando um percentual de 35,3% de todos os compostos. Os compostos testados que apresentaram atividade antibacteriana foram mais ativos contra bactérias gram-positivas nas seguintes proporções: S. epidermidis ATCC 35984 (32,0%), S. aureus ATCC 25923 (30,7%) e S. aureus ATCC 8095 (24,2%). Por outro lado, poucos compostos apresentaram atividade contra as linhagens P. aeruginosa (5,2%), A. baumannii (7,2%) e K. pneumoniae (7,2%). Nossos resultados mostram que há mais facilidade de encontrar compostos contra bactérias gram-positivas como indica a literatura. (1) A próxima etapa do trabalho incluirá a realização de ensaios de erradicação de biofilme.

Referências

1 BÉRDY, J. Bioactive microbial metabolites: a personal view. Journal of Antibiotics, v. 58, n. 1, p. 1-26, 2005. DOI: https://doi.org/10.1038/ja.2005.1.

2 TOMMASI, R. et al. ESKAPEing the labyrinth of antibacterial discovery. Nature Reviews Drug Discovery, v. 14, n. 8, p. 529-542, Aug. 2015. DOI: https://doi.org/10.1038/nrd4572.

3 CLINICAL AND LABORATORY STANDARDS INSTITUTE. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically. 10th ed. Wayne, PA: CSLI, 2015. 87 p. CLSI Document M07-A10 (v. 35, n. 2).